Validação da técnica de PCR em tempo real para melhoria no diagnóstico da doença de Chagas

Resumo

Introdução: O diagnóstico tradicional da doença de Chagas se dá por métodos laboratoriais de visualização do parasito direto ou indiretamente, e por presença de anticorpos no soro. Recentemente, o diagnóstico no HC foi realizado exclusivamente por microscopia direta. Na fase crônica da doença, o uso desses métodos é pouco confiável, devido à baixa parasitemia. Objetivo: Implementar novo método diagnóstico da doença de Chagas, tendo como meta aumentar a sensibilidade e especificidade na detecção do Trypanosoma cruzi. Metodologia: Para a validação do diagnóstico molecular da doença, utilizamos o Kit Biomol Chagas (IBMP). O teste consiste na técnica da reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR). O Kit utilizado permite a identificação do T.cruzi, através da detecção do seu DNA satélite, além de um controle interno de amplificação. Resultados: A validação foi realizada comparando 21 amostras com diagnóstico conhecido utilizando o diagnóstico molecular e a microscopia direta. Obteve-se 100% de correlação entre os resultados. Após a validação, iniciou-se a análise das amostras de rotina. Foram comparados 10 pacientes, onde 3 apresentaram resultado positivo na PCR, enquanto a microscopia não visualizou estruturas. Conclusão: A microscopia direta, tem baixa sensibilidade. Em contraste, o diagnóstico por qPCR, mostrou-se mais rápido e preciso. Apresentando melhor sensibilidade na fase crônica. Além disso, é o único exame capaz de detectar a doença na fase aguda. Este projeto representa um avanço significativo no diagnóstico da doença de Chagas, com o potencial de transformar a prática clínica e melhorar o cuidado com os pacientes.