Análise molecular de casos de Doença da HB H identificados no Laboratório de Hemoglobinopatias do HC/UNICAMP de 2002 a 2023

Resumo

Introdução: As talassemias alfa caracterizam-se pela síntese deficiente das cadeias globínicas alfa da hemoglobina (Hb), e são causadas, principalmente, por deleções que afetam um [alelo alfa⁺ (-alfa)] ou ambos [alelo alfa⁰ (--)] os genes (HBA1 e/ou HBA2) no genoma haplóide. A Doença da HbH ocorre quando apenas um gene alfa encontra-se funcional (interação alfa⁺/alfa⁰). Assim, o excedente de cadeias beta forma a HbH (beta₄), tetrâmero instável que causa anemia hemolítica moderada/grave. Objetivo: Apresentar um recorte dos casos de Doença da HbH caracterizados de 2002 até 2023 pelo Laboratório de Hemoglobinopatias do HC/UNICAMP, referência no diagnóstico da talassemia alfa. Metodologia: Na triagem protéica foram realizadas eletroforeses, HPLC e identificação da HbH em esfregaço sanguíneo. Na caracterização molecular, as deleções/mutações foram rastreadas por multiplex-gap-PCR, MLPA, análise de restrição, PCR alelo-específico e/ou sequenciamento direto. Resultados: Foram identificados 32 casos de Doença da HbH, em 27 famílias. Os alelos alfa⁺ identificados: -alfa^3.7, o mais frequente na população mundial (n=29), -alfa^4.2 (n=1), uma mutação no sítio doador de splicing do primeiro íntron do gene HBA2 e um caso envolvia Hb instável (HbIcaria). Alelos alfa⁰ resultaram de diferentes deleções extensas: do telômero com variações até o gene SOX8 (225-1050kb) (n=8), --^SEA (n=7), do elemento regulatório do cluster alfa (HS40) com variações até o gene AXIN1 (15-175kb) (n=6), --^MED (n=6), apenas no HS40 (n=3) e -(alfa)^20.5 (n=2). Conclusão: Esses resultados evidenciam a expressiva variabilidade de mutações alfa-talassêmicas em nossa população, e reforça a importância do diagnóstico preciso para uma assistência laboratorial de qualidade.