Desenvolvimento e validação de método analítico para determinação de fentanil e seus análogos em amostras de sangue seco em papel (DBS)

Resumo

O consumo mundial de opióides sintéticos de forma abusiva tem apresentado um aumento considerável, sendo este grupo o responsável, nos últimos dois anos, por 4 em cada 5 óbitos relacionados ao uso de drogas. Esse aumento fez com que a comunidade científica passasse a tratar este problema como “a crise dos opióides”. Este grupo de drogas contempla (entre outras substâncias) o fentanil e seus análogos estruturais. Diversos casos de intoxicações graves ou mesmo mortes por overdose causadas por estas substâncias têm sido descritos na literatura recente. Visto isso, o objetivo do trabalho é desenvolver um método baseado em cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas sequencial (LC-MS/MS) para determinação de fentanil, 9 análogos e 2 metabólitos, em amostras de sangue seco em papel (dried blood spot, DBS). Objetiva ainda de estudar a estabilidade destas substâncias em DBS, com a hipótese de que esta técnica de armazenamento aumenta a estabilidade das substâncias em análise. Uma alíquota de 15 ?L do sangue fortificado com os padrões foi adicionada em um disco de DBS previamente perfurado (6 mm) e deixado secar, em temperatura ambiente, por 3 horas. A extração das amostras foi feita com 300 ?L de metanol contendo padrão interno (fentanil-d5 e norfentanil-d5, 0,25 ng/mL) e 1 ?L foi injetado no sistema LC-MS/MS. Foi observada boa linearidade na faixa de concentrações entre 0,1 e 50 ng/mL. O método está sendo validado seguindo as recomendações da SWGTOX.